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现在的医院普遍开展了PCR实验室项目,而要完成一组pcr实验通常需要在试剂配制区、样品处理区、核酸扩增区、产物分析区这4大区域中进行。一个标准的PCR实验室设计涉及到哪些方面呢?
医院PCR实验室平面布局:
试剂准备区:扩增试剂的配制、分装和保存。
样品处理区:样品登记、分装;核酸提取、保存和加样。
核酸扩增区:该区域主要进行扩增实验。
产物分析区:扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。
各区配套的缓冲间及公共走廊。
注意:
1、扩增前区与扩增后区应严格分开,须使用不同的房间,两区之间最好有一定的间隔。
2、使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。
医院PCR实验室设计要点:
1、主体主要为彩钢板材质,室内所有的阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝,结构坚固、密封性好。
2、将PCR分为试剂准备、标本制备和PCR扩增检测三个独立的实验区,每个区域都有独立的缓冲间,整个区域就是一个整体的缓冲走廊,通过各区域对气压的调节,整个PCR实验室避免受到气溶胶的污染。
3、缓冲间和PCR扩增区的排风扇往外排气,外墙和各扇门上都安装有风量可调的回风口,空气通过回风口向室内换气。
4、实验区和缓冲间顶部以及传送窗内配置紫外灯消毒,对于试剂准备区和标本制备区,可配置移动紫外线灯进行局面的消毒。
5、地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面,整体性好,耐腐蚀。
6、PCR实验室可以是分散形式,也可以是组合形式。完成一组PCR实验,通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程,若实验工艺需要,还应增加样品粉碎过程。
7、核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。
8、在理想情况下,PCR实验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。 PCR实验室进风由原有中央空调控制,要求将中央空调风口安装到指定定点,且高度为地面铺装好后2600mm处。
9、若房间进深允许,可设PCR内部专用走廊。需要指出的是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊较有意义。
10、每个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人与气流,形成单向流程的保护屏障,这样避免实验的相互干扰,避免核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。
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PCR即聚合酶链式反应,是分子生物学研究和实验的常规方法,也是生物学、医学临床等领域广泛应用的实验技术。其特点是能将微量的DNA大幅增加。PCR实验室分为四个区域,进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出,四区域分别为:试剂配制区、样品处理区、核酸扩增区、产物分析区。
PCR实验室设计
PCR实验室可以是分散形式,也可以是组合形式。完成一组PCR实验,通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程,若实验工艺需要,还应增加样品粉碎。
①分散形式PCR实验室:所谓分散形式PCR实验室,是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远,呈分散布置形式。对于这种布置形式的PCRclass="wpcom_keyword_link"实验室建设设计,由于各个实验之间不易相互干扰,因此无需特殊条件要求。
②组合形式PCR实验室:所谓组合形式PCR实验室, 是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置,组成独立实验区域的形式。对于组合形式PCR实验室的建设设计,由于各个实验间集中布置,容易造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。各室在入口处设缓冲间,以减少室内外空气交换。
在PCR实验中所产生的DNA与RNA片段污染是一直以来PCR实验的重点问题。此类污染主要至上次试验中所产生的基因片段对下次试验产生的污染,而且一旦试验环境中的污染形成后很难处理。因为消毒等传统方式对于基因污染没有很良好的效果。所以在PCRclass="wpcom_keyword_link"实验室设计中一般将整套实验室设计为全新风型实验室,这样而已通过有效的换气次数来达到净化室内污染的作用。
而在控制方面也有很多不同之处,因为各单位对PCR实验的重视程度各有不同,所以在设计上也有不同,主要的控制设计有定送定排式压力控制系统、变送定排式压力控制系统变送变排式压力控制系统。在控制设备方面也有很多区分如压力无关型控制系统、压力有关型控制系统。
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