无菌室要这样管理！

一、无菌室的要求:

1，需要建立无菌室的管理制度。

2.保持良好的卫生:相对湿度为40%-60%，温度为2-22℃，最好安装空调。
3、无菌室不得进行其他工作，不得进入非操作使用的东西，不得保管检查后的馀地。
4、紫外灯的使用期限一般为300小时，记录使用时间，到期更换。

二、无菌微生物室操作和要求

以菌落总数、大肠菌群为例演示无菌实验流程。消毒实验台、手、检查用具(保证无菌环境和无菌实验用品)，微生物的理想环境是无菌的，但要保护自己。防护服，口罩手套必须佩戴。

对实验台面进行擦拭消毒，一般75%乙醇或新洁尔溶液。为了保持无菌，对容易残留细菌的部位进行消毒处理。实验台上的药品、装样品的箱子等实验用工具必须进行消毒处理。实验前检查培养基的检查、无菌条件下称为样本1)实验前检查大肠菌群培养基的量、导气管内是否有气泡。2)打开超净台风扇，在无菌、空气缓慢流动的状态下工作。3)进行无菌称呼，这一步最好戴手套。4)接种针灭菌5)接种试管口灭菌6)取菌，接种或向培养盘内倒培养基时，试管口或瓶壁外不得接触盘底，试管或瓶口应倾斜通过火焰。总结微生物实验室工作人员，必须有严格的无菌观念，许多实验要求在无菌条件下进行，主要原因之一是防止实验操作中人为污染样品，二是保证工作人员安全，防止检测出的病原菌操作不当造成个人污染。要求如下:

三、无菌室的使用和管理要求

2.室内采光面积大，从室外可以看到室内情况。无菌室管理你不得不知道的事

3.为了保证无菌室的清洁，无菌室周围需要设置缓冲走廊，在走廊旁边设置缓冲间，其面积可以小于无菌室。

4.无菌室、缓冲走廊和缓冲间设置日光灯和消毒空气用紫外线灯，杀菌紫外线灯离工作台1米为宜，其电源开关应设置在室外。

5.无菌室和缓冲间的出入口应设置拉门，门窗平整，门缝应密封，两扇门应错开，以免空气对流污染。

6.无菌室的使用和管理；
(1)无菌室应保持清洁，室内只保管酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种针、接种环等必要的检查用具。不要放置与检查无关的东西
(2)室内检查用具和长椅等保持固定位置，不要随意移动。
(3)每2~3周用2%的煤酸水溶液擦拭桌子、门、窗、桌子、椅子和地板，用3%的煤酸水溶液喷雾消毒空气，最后用紫外线灯杀菌30分钟。
(4)定期检查室内空气无菌情况，细菌数控制在10个以下，发现不符合要求时，应立即彻底消毒灭菌。无菌室无菌程度的测定方法:取普通肉汤琼脂平板，改良马丁培养基板各3个(平板直径均为9厘米)，放置无菌室各工作场所，打开盖子露出30分钟，倒置培养，细菌总数设置37℃温箱培养48小时细菌和霉菌的总数不得超过10个。
(5)无菌室杀菌前，将所有物品放在操作部位(待检查物例外)，打开紫外线灯杀菌30分钟，时间到达，关闭紫外线灯待用。
(6)进入无菌室前，必须在缓冲室更换消毒的工作服、帽子和鞋子。
(7)操作应严格按照无菌操作规定进行，操作中少说话，不吵闹，保持环境无菌状态。设备和场所的灭菌消毒

四、微生物检测用设备和场所必须进行灭菌或消毒处理。

1.微生物实验室规划设计时，高压蒸汽灭菌:工作服、口罩、稀释液等，放置高压灭菌锅，一般在121℃灭菌30分钟，当然不同的培养基有不同的要求，必须分别处理。

2.火焰灭菌:接种针、接种环等可直接火焰灭菌。

3.高温干燥灭菌:各种玻璃器具、注射器、吸管等，在干燥箱中160℃灭菌2小时。

4.一般消毒：无菌室内凳子、工作台、试管架、天平、待检物容器或包装均无法消毒，必须用其他方法消毒处理，用2%的煤酸或来苏儿水溶液擦拭消毒，工作人员的手也用这种方法消毒。

5.空气消毒:打开紫外线灯照射30-60分钟即可。
准备工作

a、进行无菌室空间消毒，打开紫外线灯30-60分钟。
b.检查用的相关器材，在搬入无菌室之前必须分别进入灭菌消毒。
c.作业人员必须洗手消毒，穿无菌工作服、帽子和鞋子，进入无菌室。
d.进入无菌室后，再次消毒手部，进行检查操作。操作过程中的注意事项e、动作轻，不要太快，不要搅动空气造成污染的玻璃器皿也要轻轻放置，不要破坏污染环境。
e.操作应在火焰附近进行。
f.接种环、接种针等金属器材使用前后必须烧毁，烧毁时首先通过内炎，干燥残留物后烧毁灭菌。
g.使用吸管时，不要用嘴直接吸管或吹管，而要用洗耳球操作。
h.观察平板时不能打开盖子。如果想接触菌落检查的话，必须接近火焰区域操作，平盘盖也不能打开，上下盖必须适当地打开缝隙。
i.染色可疑病原菌涂层时，请用夹子夹住玻璃片，不要用手直接拿着玻璃片，以免污染。使用的玻璃片也应浸泡在消毒液中消毒后再洗。
j.工作结束后，收拾桌子上的样品和器材，最后用消毒液擦拭桌子。

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